Какво е бактериологично изследване? По каква схема се извършва? Какво се разбира под безопасност в този случай? Какви са целите и етапите на бактериологичните изследвания?
Обща информация
Бактериологичното изследване е научен процес, при който се идентифицират бактериите и се изследват техните свойства, за да се постави микробиологична диагноза. От голямо значение тук е определянето на вида или вида на получения микроорганизъм (подразбира се чиста култура). Това е придружено от изследване на биохимичните и физиологични свойства на организмите, както и склонността към образуване на токсини. За тези цели се използват реакции на преципитация и аглутинация. Практикува се и заразяване на лабораторни животни с последващо откриване на патологични промени.
Работа с тестов материал
Алгоритъмът за бактериологично изследване осигурява стриктно спазване на специални инструкции. По този начин изпитваният материал трябва да се събира в стерилни съдове при асептични условия. Също така е необходимо да се погрижитеза осигуряване на доставка до лабораторията възможно най-скоро. Желателно е хладно съхранение на пробите. Техниката на бактериологичното изследване предвижда много възможни ситуации. По този начин видът на обекта, свойствата на микроорганизма и естеството на заболяването често налагат разработването на индивидуални инструкции за работа. В работата се използват голям брой различни методи. Една от най-разпространените е бактериоскопията. Но ако бактериите не са фиксирани, тогава се използва смачкана или висяща капка. Трябва да се отбележи, че последните две опции се характеризират с повишено ниво на заразност.
Бактериоскопия
В този случай се използват удари. За да ги създадете, трябва да разпределите капка от изследваната течност върху повърхността на предметно стъкло. Зейтс трябва да го изсуши. Това често се прави чрез преместване на лекарството през пламък, получен от газова горелка. Въпреки че фиксиращите съединения могат да се използват като алтернатива. За да покаже, че са извършени подготвителни действия с този препарат, той е оцветен. Целта на такава манипулация е точността, което е много важно, когато се извършва микроскопско и бактериологично изследване. В крайна сметка, ако използвате повторно лекарството за друга цел, получавате каша, с която ще бъде много трудно да се работи ефективно.
Защо бактериоскопията е толкова популярна
Не на последно място поради наличието на този метод. Ако се извърши бактериологично изследване на пресен препарат, тогава за определяне на патогенамогат да се използват микрохимични реакции или селективно оцветяване на различни структурни части на микроорганизма. Кой е по-добър? По-точен резултат може да се получи при работа с оцветен препарат. В този случай изпитваният материал се нанася върху предварително подготвено предметно стъкло. И не забравяйте да нанесете тънък (и ако е възможно равномерен) слой. След това трябва да изчакате, докато лекарството изсъхне във въздуха. След това микроорганизмите се фиксират по един от конвенционалните методи. След това охладеният препарат се подлага на оцветяване с диференциална или обикновена боя. За това могат да се използват сухи и нативни препарати. След това остава да се насочат ултравиолетови или къси сини лъчи към мястото на натрупване на организми, което кара целия микроб или определени части от тялото му да свети.
Практическо приложение на бактериоскопията
Използва се за диагностициране на редица инфекциозни заболявания. Най-известните от тях са туберкулоза, гонорея и рецидивираща треска. Освен това те прибягват до изследвания, за да проучат целия комплекс от микрофлора на орган или продукт. Но критиците често посочват относителната ненадеждност и неточност на този метод.
Посеви и субкултури от бактериални култури
Изпълнете ги с пипета на Пастьор. Извършването на бактериологично и цитологично изследване често е трудно да се извърши без инокулация и субкултура по време на работния процес. Когато работите с пипета на Пастьор, нейният връхотчупете с пинсета. След това самият инструмент се пренася през пламъка на горелката и след това се оставя да изстине. Между другото, за сеитба могат да се използват както течни, така и твърди хранителни среди. Изборът се влияе от това какви цели на бактериологичните изследвания се преследват. В същото време е необходимо да се придържате към алгоритъма на работа и предпазните мерки за безопасност. Така че, когато работите с течна хранителна среда, е необходимо да се гарантира, че тя не се разлива и не намокря краищата на тапата и епруветките. Когато изследването се извършва с твърд материал, често се използва специална игла за навлизане в културата. Когато се извършва сеитба и презасяване, те трябва да се извършват близо до пламъка на газова горелка. За чистота на експеримента епруветката не трябва да остава отворена за дълго време. Що се отнася до инструмента с култура: трябва да се уверите, че не докосва нищо. Също така, техниката на бактериологично изследване предвижда изгаряне на ръбовете на епруветката преди затварянето й. Готовият продукт трябва да бъде подписан веднага след производството, за да се избегне объркване в бъдеще.
Ефективност на сеитбата
Смята се, че този метод позволява получаването на по-точни и надеждни данни по време на бактериологичната диагностика от разглежданата преди това бактериоскопия. В този случай алгоритъмът на действията е следният:
- Първоначално чиста култура се намазва върху повърхността на хранителната среда, която се излива в паничка на Петри.
- Първоначалната сеитба трябва да се извърши при благоприятни за вида условиямикроорганизми.
- След ден-два, при наличието на оптимална среда, всички подходящи колонии се преместват там, където могат да се развият максимално. Това ги освобождава от външна микрофлора.
Крайният резултат е култура от хомогенни бактерии, които могат да бъдат идентифицирани.
Чисти култури
Но как се правят? За това се използват биологични и механични методи. В първия случай голяма роля играят хранителните среди, където има необходимите условия, благоприятни за развитието на определена култура. Подход може да се използва и когато лабораторни животни, чувствителни към определен вид бактерии, се заразят. Механичните методи се основават на използването на стерилен инструмент, с който културата се поставя в хранителна среда, разположена в първата, втората и третата петриеви блюда. След това е необходимо да се изчака, докато отделните колонии растат и чистата култура вече ще се откроява от тях. Бактериите могат да се отглеждат и в специални термостати, където температурата се поддържа на определено ниво (обикновено около 37 градуса). В този случай процесът продължава около един ден. Но в зависимост от вида на микроорганизмите могат да се установят и други термини. Важно е и наличието на необходимата концентрация на кислород. За да направите това, използвайте различни методи за аериране. Досега говорихме за ситуацията като цяло и като цяло, но сега нека насочим вниманието си към каква е схемата на бактериологичните изследвания.
Упражнение
Често се използва набор от методи за откриване на патогенни микроорганизми в тялото на пациент или потенциален носител. Използваните материали и методи зависят от целите на анализа, както и от условията на средата, в която се извършва работата. На практика най-често бактериите се откриват чрез кръвни култури, взети от човек или животно. Ако локалните лезии са добре дефинирани, патогените могат да се търсят в проблемните зони. Това е типично за такива заболявания като дизентерия, гонорея, дифтерия и редица други подобни. В особено тежки случаи този процес се разделя на отделни етапи на бактериологично изследване (което е типично за коремен тиф). Всеки от тях използва свои собствени методи, които са насочени към откриване на причината за инфекцията. Нека разгледаме по-подробно ситуацията с коремен тиф. През първата седмица от заболяването най-надеждният начин за диагностициране на заболяването е кръвната култура. На второ, серологичното изследване се счита за такова. На третата седмица се изследват изпражненията. Последният метод се счита за проверка на реконвалесцентите.
Идентификация на микроорганизми
Започва с процеса на боядисване. След това гледат как бактерията може да разгражда въглехидратите, аминокиселините и т.н. Освен това този процес може да бъде допълнен от изследване на други свойства, които всеки отделен род или вид микроорганизми притежава. Като пример трябва да се дадат възможностите за разтваряне на еритроцити на различни животни, ефекта върху коагулацията на кръвната плазма и разтварянето на съсирека.фибрин и така нататък. Всичко това са диференциалните особености на отделните представители на микросвета. Също така, серологичната идентификация може да се използва за окончателно разпознаване (но това обикновено се отнася до патогенни бактерии, които принадлежат към чревното семейство).
Заключение
Трябва да се отбележи, че редица микроорганизми не могат да бъдат идентифицирани по методите, описани в статията. В този случай широко се използва практиката на заразяване на лабораторни животни. Изчислението се прави въз основа на факта, че ще се появи характерна токсичност или патогенност, която не се наблюдава при изкуствени условия. Инфекцията може да се използва и като метод за натрупване на патогенни микроби. И вече когато се сравнят характеристиките на изследваната култура, открити в процеса на изследване на биологични, морфологични, серологични и биохимични свойства, можем да кажем, че е известно с какъв вид микроби имаме работа. Идентификация означава индикация за рода, вида и вида на бактерията. Ако изследваният микроорганизъм се отклонява в определени свойства от типичната си характеристика, това трябва да бъде посочено. Редица експерти смятат, че в такива случаи ще бъде полезно повторното идентифициране с дублиране на всички използвани методи и техники. Понякога изследванията могат да бъдат изведени на следващото ниво, което изисква по-сериозен (и по-скъп) подход. Ако са получени отрицателни резултати, това означава, че препаратътмикроорганизми липсват или не са жизнеспособни. Но за точността на изследването, ако има съмнение за редица бацилоносители (дизентерия, дифтерия, коремен тиф), в такива случаи се показват повторни проверки. Това е необходимо, за да могат специалистите да имат точна представа с какво трябва да се справят.
