Хепатит С е инфекция на черния дроб, причинена от HCV вируса Flaviviridae, който се състои от една или повече молекули РНК. По правило се предприемат поредица от диагностични мерки за установяване на хепатит С при пациент. PCR е анализ, който точно потвърждава диагнозата. Често заключението се дава от лекарите, когато пациентът вече има първите признаци на заболяването.
Какво е хепатит C
Увреждането на черния дроб от вирусна инфекция, предавана чрез кръв или полов контакт, в медицината се нарича хепатит С. Причинителят е РНК-съдържащ вирус на неклетъчни инфекциозни агенти от семейство Flaviviridae. Инфекцията може да остане в тялото дълго време, без да се прояви. Следователно, само когато микроорганизмът бъде открит чрез кръвен тест с помощта на PCR RNA RNA, хепатит C (като диагноза) се счита за оправдан.
Flavivirus не се произвежда в изкуствено отгледани изолирани клетки. В процеса на размножаване инфекциозният агент създава имунологично различни модификации. Тези фактори пречат на тялото да даваподходяща защитна реакция и експертите срещат трудности при разработването на ефективна ваксина.
Вирусът се предава парентерално. За инфекция, той трябва да влезе в достатъчни количества директно в кръвния поток.
Какви изследвания се правят за хепатит C
Вирусните патологии на черния дроб се диагностицират с помощта на лабораторни изследвания. Клиничните изследвания на хепатит С се извършват чрез изследване на чужди и опасни антигени или протеинови съединения (антитела) в биоматериала на пациента, главно в кръвта.
- Ензимен имуноанализ (ELISA). Методът се основава на откриване на lgM антитела в кръвта. Имуноглобулинът се счита за най-големия и е пентамер. Проявява се в първичната защитна реакция на лимфоцитите към неизвестно чуждо вещество.
- Радиоимуноанализ (RIA) - количествено определяне на lgM имуноглобулин с помощта на белязан радиоактивен изотоп на йод.
- PCR на хепатит С - определяне на вирусна РНК в биоматериала (кръвта). Този анализ надеждно потвърждава диагнозата.
IgG тестването не е надеждно. Присъствието му в кръвния серум може да показва не само наличието на флавивирус, но и друга минала инфекция, която има същия патоген.
Какво определя PCR анализа
Полимеразна верижна реакция (PCR) се основава на идентифицирането на ДНК региони, специфични за определени патогени в проби от материал за изследване (епител, кръв). Анализът дава възможност да се идентифицират най-малките патогенни организми (вируси) чрез откриване на тяхната РНК или ДНК в биологичен материал.
Лабораторна процедура за откриване на антитела Хепатит C PCR се провежда на 3 етапа:
- Изберете. Изследваният биоматериал се пречиства от примеси и се получава ДНК в подвижната фаза на хроматографската колона.
- Усилване. Анализът се извършва в цикъла устройство-термостат. Той загрява и охлажда епруветките с определена цикличност. За едно изследване се извършват до 35 цикъла. Резултатът е достатъчен брой ДНК фрагменти за откриване, идентифициране и оценка на патогена.
- Електрофореза. Получените фрагменти се поставят в гел с различно насищане на агароза и се извършва електрофореза. Получената електроферограма се анализира на компютър.
Използва се не само стандартното PCR изследване, но и PCR анализа в реално време. Това е диагностика в реално време. Методът позволява качествен и количествен анализ, което дава възможност да се идентифицира формирането и динамиката на заболяването, както и да се предпише терапия, насочена към елиминиране на причината за произхода на патологията. PCR в реално време също се използва за определяне на чиста култура на инфекциозни агенти (генотипиране).
Как се прави тестът за полимеразна верижна реакция
За диагностика може да се използва всяка човешка биологична течност. Биоматериалът за изследване на хепатит С обикновено е кръв.
Вземането на проби за диагностика се извършва в процедуратаофис. За да вземете кръв, използвайте епруветки за еднократна употреба с вещество, което инхибира съсирването на кръвта. Дейностите, насочени към предотвратяване на разпространението на инфекциозни агенти, помагат да се избегне навлизането на друг щам микроорганизми отвън.
Кръв за PCR на хепатит С се взема сутрин на празен стомах. Пробата се изпраща незабавно в лабораторията. Разрешено е съхраняването на биоматериала при температура от +4 до +8 градуса по Целзий. Контейнерите са етикетирани и снабдени с указания. Резултатите от теста са налични в рамките на 48 часа, понякога по-рано.
Видове PCR
Обхватът на приложение на полимеразната верижна реакция е доста широк. Инфекционистите определят с помощта на PCR хепатит В, болести, предавани от кръвосмучещи насекоми, СПИН, туберкулоза. В онкологията, използвайки този метод, туморните клетки се откриват в ранен стадий.
Има около четиринадесет типа анализи. Използването на един или друг вид зависи от обхвата и крайните резултати на анализите. Някои видове PCR са незаменими, когато резултатът е необходим в рамките на 20 минути.
За диагностициране на хепатит С се използват 3 вида полимеразна верижна реакция:
- Качествената оценка може да бъде или положителна, което показва наличието на инфекция в тялото, или отрицателна, показваща липса на флавивирус.
- PCR в реално време (количествен анализ) - определя количествената РНК на патогена в IU/ml.
- Генотипирането е анализ, който разкрива типа (генотипа) на вируса.
За точно идентифициране и определяне на заболяването, последвано оти трите вида изследвания се използват за предписване на оптимална терапия.
Качествен анализ на полимеразна верижна реакция
Анализът е задължителен за всеки, който има ELISA, който е открил антитела срещу HCV. Качественият PCR за хепатит С е стандартният тест за чувствителност. Методът е насочен само към откриване, не се извършва броене или изолиране на други вещества.
За откриване на антитела се използват специални тест-системи с праг на чувствителност от най-малко 50 IU/ml. Ако се открият антитела, се предписват други изясняващи тестове. Ако резултатът е отрицателен, няма да се правят допълнителни тестове.
В някои случаи фалшиво отрицателният резултат може да се дължи на некомпетентен лабораторен персонал или некачествени реагенти. За застраховка е по-добре да направите отново анализа на друго място.
Количествен PCR
Методът се използва за директно изследване на броя на флавивирусите в един реакционен цикъл. За точно измерване се използват ДНК фрагменти, използвани за хибридизация, или флуоресцентно белязани праймери. Има икономична опция за откриване с помощта на боята SYBL Green. Багрилото се забива в малък жлеб в ДНК и става синьо, когато се облъчи с лазер.
Концентрацията се определя от апарата-усилвател в цифров еквивалент. Стойностите може да варират леко между лабораториите и следователно трябва да се сравняват с референтните стойности.
Количествен PCRхепатит С помага да се избере оптималната дозировка на лекарствата и да се определи продължителността на терапията. Честотата на изследването зависи от стадия на заболяването, вида на генотипа и предписания курс на лечение.
Определяне на генотипа
Вирусът на хепатит С има променлив генетичен състав. Многобройни модификации правят невъзможно създаването на ваксина, а също така усложняват терапията. Общо 11 генотипа и 100 подтипа са идентифицирани и записани. В страните от бившия СССР при лица, заразени с хепатит С, PCR открива главно генотипове 1b и 3.
В присъствието на някой от генотипите, цироза или рак на черния дроб могат да се забавляват. Ето защо е толкова важно да откриете вируса навреме.
За някои пациенти някои лекарства, предназначени за борба с HCV, са токсични. Генотипирането ви позволява да определите вида на протеина и да предпишете ефективно лекарство.
В резултатите от тестовете за въвеждане има число с малка латиница, указваща генотипа на вируса. Ако HCV е открит, но не е въведен, това означава, че лицето има генотип, който не е типичен за определен географски район.
Резултати от анализа
Лекарят се занимава с дешифрирането на резултатите. Само данни от няколко проучвания (заедно с анамнеза и преглед) могат да дадат цялостна реална картина на медицинската история.
- При здрав човек тестът за качествена реакция в биоматериала не открива нищо. Ако е посочена стойността "открита", инфекцията се потвърждава и пациентътсе нуждае от допълнителна диагноза, последвана от лечение.
- Определянето на броя на инфекциозните агенти дава възможност да се оцени вирусното натоварване на организма. Обикновено количествената PCR на хепатит С не открива патогена. Показател до 810^5 се счита за ниско натоварване и при подходяща терапия гарантира благоприятен изход. По-високите стойности изискват задълбочен преглед и определяне на дългосрочна терапия, за чийто положителен резултат никой не може да гарантира.
- Положителните резултати от генотипирането показват кой генотип е разпознат. Отрицателният резултат показва или липсата на флавивирус, или наличието на генотип, който не е типичен за този регион.
Какво показва положителният PCR тест
Всяко сериозно заболяване изисква цялостна диагноза. Положителният PCR за хепатит C потвърждава диагнозата, но прогнозите могат да се правят само след допълнителни лабораторни и инструментални изследвания.
Откриването на вирус не дава пълна картина на патологията. Необходимо е да се идентифицира неговият вид и естество, да се определи как засяга черния дроб и други органи. Ранното откриване на HCV често води до благоприятен терапевтичен резултат.
Отрицателен PCR с положителен ELISA
При наблюдение на симптомите, характерни за увреждане на черния дроб, има голяма вероятност инфекцията да е влязла в тялото. Ето защо трябва да се свържете с хепатолог или специалист по инфекциозни заболявания. По време на интервютата специалистът ще събере анамнеза и ще предпише необходимия преглед.
Акорезултатите от изследванията на хепатит С PCR са отрицателни, а ензимният имуноанализ е положителен, това показва наличието на антитела към флавивируса в кръвта. Това обикновено се случва, когато инфекцията навлезе в тялото в малко количество, така че имунната система се справи сама с нея. Но такива хора все още се считат за заразени и трябва да бъдат прегледани на всеки 6 месеца. Ако при такива резултати от теста на човек бъде отказан безплатен медицински преглед, по-добре е да вземе PCR срещу заплащане за поддържане на здравето и ако резултатите са положителни, свържете се със специалист за диагностика и лечение.
Предимства и недостатъци на метода
При установяване на диагнозата хепатит C, PCR има няколко предимства:
- Ранно откриване на патоген.
- Точно определение на вируса.
- Ефективност на диагностиката.
- Минимален процент на грешки.
- Висока чувствителност.
Недостатъци на метода:
- Висока цена на анализа. Изследването изисква скъпо оборудване, реактиви и висококвалифициран медицински персонал. Всичко заедно представлява значителна сума.
- Стриги изисквания за транспортиране на биоматериал.
Лечение на възпаление на черния дроб
PCR анализът за вируса на хепатит С се счита за основен за диагнозата, но не и окончателен. За да бъде ефективна терапията, са необходими редица допълнителни лабораторни и инструментални изследвания. След преминаване на всичкидиагностични мерки, които лекарят предписва лечение:
- Предписана е диета №5.
- Алкохолът е напълно изключен.
- Съвместен прием на интерферон и рибавирин за 25 дни.
- Курсови хепапротектори "Essentiale", "Karsil", "Phosphogliv".
- В специални случаи се използва дискретна плазмафереза.
Лекарствата, предписани от хепатолог, се използват редовно, без да се променя дозировката. Продължителността на приема на лекарствата се определя от лекаря след преминаване на контролните тестове. След приключване на курса на терапия, трябва да посещавате лекар на всеки шест месеца.
PCR-диагностика позволява да се идентифицира причинителят на хепатит С в ранен стадий. Това допринася за ефективността на терапията и предотвратяването на преминаването на болестта в такива опасни форми като цироза и хепатоцелуларен карцином.
