Според статистиката на СЗО през последните 40 години 25 милиона души са починали от СПИН. Щетите от тази инфекция са огромни. Повечето от заразените се оказаха в Африка, откъдето идва и тази инфекция. При ХИВ диагнозата на заболяването става особено актуална. Вярно е, че все още няма лекарства за ХИВ, но ранното лечение може да удължи живота на пациента и да подобри качеството му.
Диагностика на ХИВ инфекция
ХИВ инфекцията се определя на различни етапи по следните методи:
- ELISA - ензимен имуноанализ.
- Western blot.
- PCR - полимеразна верижна реакция.
- Бързи тестове.
PCR методът е разработен от американския биохимик Кари Мълис, който получи Нобелова награда за него през 1983 г. Днес този метод в медицината при диагностицирането на всички инфекции се счита за водещ поради своята точност и информационно съдържание. ХИВ не е изключение в това отношение.
Същността на анализа
Всяка жива клетка съдържа РНК и ДНК. Тези нуклеинови киселини са способни на самокопиране и саморепликация. За всяка инфекция ДНК фрагментите са уникални. ATв биологичните течности тези фрагменти от нуклеинови киселини циркулират. Те се улавят и разпознават от специално оборудване – реактора. Това е основата на метода. Лаборантът преброява тези фрагменти. Ретровирусът ХИВ се следи за РНК. Дори с единични копия на вирусни частици, PCR може да ги открие и преброи.
Венозната кръв най-често се използва като тестова течност. Специалните компоненти на метода се свързват с вирусните частици и ги правят откриваеми, тъй като намерените фрагменти се умножават.
В случай на ХИВ резултатът от наличието на вируса може да бъде получен много преди да се появи клиниката. Следователно, поради високата си чувствителност, PCR има толкова висока диагностична стойност. Огромен плюс на PCR е гъвкавостта на метода. Инкубационният период на инфекция за PCR не е пречка.
Разходи за проучване
PCR методът е доста скъп. Това е един от големите му недостатъци. Изисква най-ново оборудване и висококвалифициран лаборант. С оглед на гореизложеното PCR диагностика не се извършва в малки населени места. Можете да се изследвате само в специализирани големи клиники.
Цената за изследване на ХИВ ДНК в московските клиники започва от 2800 рубли, вирусният товар (вирусната РНК в плазмата) се определя чрез PCR - от 8800 рубли, а устойчивостта на ХИВ към протеазни инхибитори - от 16 500 рубли. Както виждате, цените са доста високи. PCR може да се направи безплатно в обществени клиники съгласно политиката на MHI. важно,че процедурата може да се извърши анонимно. В регистъра пациентът получава номер, по който може да разбере резултата. В съвременните медицински центрове има лични акаунти на клиенти, където ще се въвеждат тези данни.
Изследователски цели
PCR диагностика за ХИВ се предписва в такива случаи:
- Откриване на инфекция при дете, родено от болна майка или носител за определяне на вътрематочна инфекция.
- Ако ELISA даде съмнителни резултати (PCR за HIV помага в този случай да се направи окончателна диагноза).
- За откриване на количественото съдържание на вируса в тялото.
- С положителен имуноблот те се допълват взаимно с PCR.
- Тестване на донори.
- За ранна диагностика на ХИВ.
- За определяне на ефикасността и резистентността към ART.
Предимството на този анализ е, че PCR за ХИВ може да се извърши дори за деца под една година.
Изследването често се извършва не за първична диагноза, а вече в процес на лечение. Първичната диагностика е серологични изследвания (те определят нивото на антитела срещу ХИВ). Ако фалшиво положителен резултат се повтори, това може да е с нисък вирусен товар.
PCR диагностицира ХИВ, когато все още няма антитела срещу него. Методът ELISA в този случай няма да даде отговор.
И PCR за ХИВ вече ще бъде положителен. Но симптомите на този период на ХИВ са неспецифични. Първоначално пациентът се лекува дълго време и неуспешно за ARVI от общопрактикуващ лекар. Трябва да се има предвид, че диагнозата ХИВ се основава само наPCR не се поставя, е необходимо да се преминат други изчерпателни тестове. PCR методът е по-често спомагателен при трудни случаи.
Подготовка за анализ
Преди да вземете PCR за ХИВ, 2 дни преди теста, не трябва да ядете мазни храни, алкохол. Също така е по-добре да не се напрягате психически и физически. Ако на пациента е предписан курс на имуностимулация, той се спира 2 седмици преди анализа.
Кръвта се приема най-добре сутрин. Други биологични течности на тялото (сперма, вагинална секреция) също могат да бъдат изследвани, но кръвта е най-добрият материал. Слюнка, пот, урина и сълзи не се използват, тъй като съдържанието на вируса в тях е минимално.
Плюс от PCR за ХИВ
Предимствата на метода са изключително ниската вероятност за фалшиво положителен резултат, универсалността на реакцията за всякакви биологични течности на тялото. Анализът има широк диапазон:
- Едно вземане на кръв може да се използва за откриване на различни инфекции.
- Техника е спешна, резултатът е готов още на следващия ден.
- Увереността е между 85 и 98%.
- Наличието на ХИВ може да се определи 10-14 дни след заразяването (в момента все още няма антитела).
- Без възрастово ограничение, може да се извърши веднага от раждането.
Недостатъци на метода
Недостатъците на PCR са както следва:
- Разходи за анализ.
- Изисква сложно медицинско оборудване.
- Изисква висококвалифициран лаборант и лекар,анализ на бейкъра.
- Реакцията е много чувствителна, така че грешката може да е 20%.
- Може да доведе до фалшиво положителен резултат, ако пациентът има автоимунни процеси, онкология, хронични инфекции.
- Необходима е специална чистота на лабораторните помещения, тъй като вирусът може да попадне в анализа от въздуха. Тогава резултатът ще бъде грешен.
За лаборатории, които провеждат PCR, за подобряване на качеството на диагностиката са разработени специални стриктни мерки съгласно системата за вътрешен контрол SanPiN. Освен това трябва да се спазват всички правила за работа с тази техника:
- Изисква се стриктно да се спазва информацията в епруветките.
- Преди вземане на кръвна проба, погледнете отново и се уверете, че анализът е насрочен.
- Сестрата трябва да етикетира правилно епруветките.
- Лаборантът трябва правилно да извършва всички манипулации с биоматериала, за да предотврати кръстосано замърсяване.
- Тестовата система трябва да е с отлично качество.
Само ако всички тези условия са изпълнени, грешката в отговора може да бъде само около 2% от епизодите.
Продължителност на анализа
Много се интересуват колко време ще бъде готов PCR за ХИВ. Диагнозата продължава не повече от 8 часа. Пациентът може да получи отговор още на следващия ден. Експресното тестване се извършва в рамките на 2 часа.
PCR надеждност
Въпреки многото си предимства, PCR не се счита за идеален диагностичен метод. Свързват се с него в случайнеобходимостта от получаване на скринингови тестове за наличие на ХИВ в тялото.
Кога се взема кръв за анализ?
Колко време да приемате PCR за ХИВ? Достоверен резултат може да се получи още при вземане на кръв 4-4 дни след предполагаемата инфекция. След 2 седмици надеждността за ХИВ ще бъде 98%, а с период от 5 дни - 80%. Наличието на отрицателен резултат в PCR за ХИВ ще бъде надеждно, но за абсолютно точен резултат се извършва и ELISA.
ELISA анализът ще бъде ефективен само ако има антитела срещу вируса, това време може да отнеме от 1-3 месеца до шест месеца. Тъй като ELISA дава по-висока вероятност (98% -99,9%), PCR не може да се нарече 100% потвърждаващ тест за наличие на HIV инфекция. Но от друга страна, това е единствената техника, при която не е нужно да чакате появата на антитела.
С HIV PCR може да предостави информация за ефективността на ART, стадия на HIV заболяването и броя на VNs (количествена оценка на наличието на HIV в тялото). Това ще говори за тежестта и степента на промяната.
PCR тестване за HIV също е необходимо, ако има антитела в кръвта, но тяхното присъствие не показва клинично надеждността на HIV инфекцията.
Те са тествани не само за инфекция и случаен секс. Други поводи:
- Планиране на бременност.
- Предстояща операция.
- Случаен секс.
- Някои професии изискват този тест за допускане до работа (учители, лекари и друг медицински персонал).
- Затворници.
- пациенти с туберкулоза.
- Служители на Министерството на извънредните ситуации и полицията.
- Върнат от ваканция от екзотични страни (ако искате да сте сигурни, че няма инфекция).
- Проститутки.
- Чуждестранни студенти.
- Наркотици.
Освен това, някои симптоми при пациент могат да наложат тест за ХИВ:
- Внезапна загуба на тегло.
- Диария, продължаваща повече от 3 седмици
- Неразумна висока температура за дълго време.
- Подути лимфни възли.
- Необяснима причина за пневмония, кандидоза и др.
Дешифрирането на анализа е прерогатив на лекуващия лекар, а не на лаборанта.
PCR или ELISA, кое е по-добре?
Когато PCR-диагностиката на РНК на ХИВ вируса се открива както качествено, така и количествено. Този анализ ясно идентифицира специфичен патоген, дори ако има няколко кръстосано реагиращи патогени. Биологичният материал може да се използва дори в изсушена форма. Недостатъкът е високата чувствителност на PCR, когато може да се даде фалшиво положителен резултат от наличието на дори малко количество чужда ДНК върху инструменти или епруветка.
Задачата и възможността на ELISA е да определи наличието на антитела срещу ретровирус. Въпреки че точността му е 99%, той не е приложим в ранните етапи.
Качествен тест за ХИВ
Висококачествен PCR за ХИВ определя наличието на вируса в тялото. Резултатите в този случай ще изглеждат така: положителни, фалшиво положителни, отрицателни. Но това проучване няма да даде информация за количеството на ретровируса. Такъв качествен анализнеподходящо, когато HIV инфекцията вече е била открита в тялото по друг начин.
Невъзможно е да се контролира ефективността на лечението с висококачествен PCR.
количествено определяне на ХИВ
Извършва се само от заразени с ХИВ хора, за да се преброи броят на копията на вирусна РНК в биологичен продукт.
Целта на такова изследване е да се следи текущото лечение и да се идентифицира резистентността на вируса към него. Антивирусната терапия при такива изчисления не се предписва сляпо от лекар, така че ще бъде по-ефективна. Количествен PCR за HIV инфекция се прави много по-често. Този анализ се показва като копие/мл кръв.
Какви резултати могат да бъдат дадени:
- РНК на вируса липсва или е много малка (около 20 копия/ml). Няма сигурност за диагнозата.
- От 20 - до 10 до 6-та степен копия / ml - диагнозата е надеждна.
- Повече от 106 копия/ml - висока VN.
Лабораториите могат да извършват PCR тестове в реално време за ХИВ. Това предполага наблюдение и числена оценка на натрупването на PCR продукти с автоматично записване на резултатите.
